Основные направления научных исследований
1. Сравнительное изучение спонтанных инфекций обезьян, определение этиологической значимости патогенных и условно-патогенных бактерий при кишечных и внекишечных заболеваниях, определение сходства и отличия прототипных бактериальных возбудителей заболеваний обезьян и человека.
2. Использование лабораторных приматов в целях испытания безопасности, профилактической и лечебной эффективности отечественных вакцин, пробиотиков, других биопрепаратов, предлагаемых для внедрения в клиническую практику.
3. Изучение паразитофауны обезьян разных видов в целях разработки методов терапии для медицинской и ветеринарной практики
Плановые темы
1. Влияние диссеминации экзогенных бактериофагов на динамику фагочувствительности патогенных и условно-патогенных бактерий обезьян при исследовании на индивидуальном и групповом уровне.
2. Этиологическая структура паразитарно-бактериальных ассоциаций при кишечной патологии обезьян.
Научно-практическая работа
а) профилактический осмотр обезьян с целью выявления носительства патогенной и условно-патогенной кишечной микробиоты, а также инвазированности гельминтами и простейшими;
б) отбор клинически здоровых животных для экспериментальных работ (бактериологическое и паразитологическое исследование обезьян);
в) карантин вновь прибывших обезьян (бактериологическое и паразитологическое исследование животных);
г) по диагностике заболевания и смертности обезьян разных видов, проводится индикация и идентификация патогенных возбудителей до вида и серологического варианта, а также определение чувствительности к антибиотикам и бактериофагам, выделенных патогенов для выбора наиболее эффективных лечебных препаратов;
д) санитарно-микробиологическое исследование (контроль микробной обсемененности поверхностей методом смывов).
Результаты научных исследований
а) Длительные исследования у обезьян, содержащихся в условиях неволи, показали разностороннюю характеристику носительства возбудителей урогенитальных и респираторных инфекций представителей класса Mollicutes. Было показано, что воспалительные процессы урогенитального тракта, бесплодие у обезьян могут быть связаны с микоплазменной инфекцией. Проведение молекулярно-генетических исследований с использованием праймеров для детекции фрагмента гена, кодирующего 16S PHK микоплазм, показали высокую специфичность выделения M.hominis и Ur.urealyticum. При культивировании сыворотки крови и образцов урогенитального тракта, как у людей, так и у обезьян были выделены колонии неизвестного морфотипа – чрезвычайно мелкие, в десятки раз меньше, чем классические колонии. Обнаружение мини-колоний указывает на большое разнообразие морфотипов у микоплазм, чем было ранее. Клетки мини-колоний устойчивы к различным неблагоприятным факторам, вызывающим гибель клеток классических колоний. Выделенные мини-колоний у обезьян не были обусловлены клинически выраженной патологией, что свидетельствует о способности их к персистенции в организме животных.
б) Изоляты S. aureus изучали фенотипическими и молекулярно-генетическими методами. Установлено, что геномы штаммов MSSA, выделенных у обезьян, различаются специфичностью нуклеотидных последовательностей генов хромосомного «ядра», детерминирующих синтез факторов вирулентности (коагулазы), а также содержат различный набор генов, кодирующих энтеротоксины А, В, С, продукты которых обладают суперантигенной активностью. Методами соа-типирования выявлены 4 размера ампликонов коагулазного гена и обнаружены 23 типа рестрикции коагулазного гена, подтверждающие циркуляцию 23 штаммов S. aureus в стаде обезьян питомника. Несмотря на существование 23 типов соа-гена, наиболее распространёнными соа-ПЦР-ПДРФ паттернами (вариантами) были только пять. Все изоляты охарактеризованы по широкому спектру генетических детерминант, ответственных за вирулентность S. aureus. Генетические детерминанты для факторов слипания (clfA, clfB) и α-гемолизина (hla), присутствовали практически во всех штаммах, что свидетельствует о важной роли этих факторов для выживании S. aureus. Разнообразие маркеров генетической патогенности золотистых стафилококков, выделенных из лёгких, по сравнению с S. aureus, обнаруженными из других биотопов, свидетельствует о более высокой патогенности штаммов S. aureus, вызывающих пневмонию у обезьян. Анализ распространённости генетических детерминант вирулентности, подтверждает патогенность выделенных от обезьян изолятов S. aureus.
в) Получены данные о встречаемости Blastocystis spp., протозойного паразита кишечника обезьян, содержащихся в адлерском питомнике. Показана наиболее высокая встречаемость бластоцист у больных и погибших обезьян с кишечной патологией по сравнению с клинически здоровыми животными. Установлено, что патогенное влияние бластоцист на организм животного зависит от степени инвазии паразитом. При слабом заражении клинические признаки могут отсутствовать. Бластоцисты были выявлены у всех видов обследованных обезьян в популяции питомника. В большинстве случаев обнаруживалась наиболее патогенная вакуолярная форма паразита. Среди возрастных групп частота встречаемости бластоцист гораздо выше у молодых и старых, как у больных, так и погибших обезьян, а также погибших детенышей до 1 года. На фоне бластоцистоза выявлено значительное снижение содержания облигатной микрофлоры толстого кишечника и увеличение числа условно-патогенных видов. Нарушая баланс микроорганизмов, бластоцисты способствуют созданию благоприятных условий для развития патологических процессов. Полученные данные подтверждают как потенциальную, так и реальную этиологическую роль бластоцист в кишечной патологии обезьян.
Персонал
1.Аршба Илона Мурмановна - и.о. зав. лаб., вед. научн.сотр., к.б.н.
2.Калашникова Виктория Алексеевна - вед. научн. сотр., к.б.н.
3.Егорова Татьяна Петровна - старш. научн. сотр.
4.Султанова Офелия Ашрафовна - научн.сотр.
5.Демерчян Алвард Варткесовна – научн. сотр.
6.Чернова Светлана Александровна - старш. лаборант
7.Леншина Яна Игоревна - лаборант-исследователь, аспирант
8.Полякова Вероника Игоревна – лаборант- исследователь, аспирант
9.Гедерян Ася Меликовна – лаборант
Научное сотрудничество
•ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского», Роспотребнадзора по доклиническому испытанию на обезьянах различных лекарственных форм иммунобиологических препаратов (КИП, интерферон α, бифидобактерии, а также в сочетании с антибиотиками). По данному разделу работы получены патенты (6 патентов) и совместные публикации.
•ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского», Роспотребнадзора, Лаборатория клинической микробиологии и биотехнологии бактериофагов. Совместные научные исследования и публикации.
•ФГБУ «НИЦ эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи», Минздрава России, г. Москва, Лаборатория микоплазм и L-форм бактерий. Совместные научные исследования и публикации.
•ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ, Минздрава России. Совместные научные исследования и публикации.
•Высшая медицинская школа Ганновера, Ганновер, Германия
•Институт экспериментальной патологии и терапии Академии наук Республики Абхазия, г. Сухум.
Патенты на изобретения
1. Патент РФ № 2317065 «способ определения целевой доставки в желудочно-кишечном тракте твёрдой лекарственной формы с защитным покрытием», приоритет от 15.12.2006, зарегистрирован 20.02.2008.
2. Патент РФ № 2322506 «Способ определения действия покрытия капсул для штамма Bifidobacterium adolescentis МС 42 от содержимого желудка», приоритет от 05.12.2006, зарегистрирован 20.04.2008.
3. Патент РФ «Способ диагностики хламидийной инфекции человека или обезьян и набор для его осуществления» № 2008151550 (решение на выдачу патента от 01.12.2009, приоритет от 26.12.2008).
4. Патент РФ «Способ прогнозирования манифестной или стёртой формы хламидийной инфекции человека или обезьян и набор для его осуществления» № 2008454548 (решение на выдачу патента от 01.12.2009, приоритет от 26.12.2008).
5. Патент РФ 2019128205 «Устройство для моделирования in vivo бактериальных биопленок» (зарегистрирован 22.01.2020, приоритет от 09.09.2019).
Публикации
С 2015-2019 годы опубликовано 47 научных работ, из них 14 статей в рецензируемых журналах, рекомендуемых ВАК, 22 материала международных и 11 тезисов всероссийских конференций.
1. Kalashnikova V.A. The use of genodiagnostics for typing of Helicobacter pylori in monkeys//JVet Sci Med Diagn 2015,4:1.
2. Калашникова В.А. Чувствительность к антибактериальным препаратам Staphylococcus aureus, изолированных от обезьян.// Журнал «Вестник ветеринарии», 2015, №75(4), с.35-40.
3. Аршба И.М., Раковская И.В., Бархатова О.И., Левина Г.А., Горина Л.Г., Гамова Н.А., Гончарова Н.А. Инфицированность микоплазмами обезьян, находящихся в условиях неволи и вновь привезенных из Танзании. Астраханский медицинский журнал, 2016, том 11, №2, с.64-70.
4. Егорова Т.П., Кебу Т.И. Лямблиозная инвазия у низших обезьян в условиях неволи. Материалы Сочинской третьей международной научной конференции «Фундаментальные и прикладные аспекты медицинской приматологии», Сочи, 8-10 августа 2016,т.1, с.232-238.
5. Аршба И.М., Раковская И.В. Микоплазменные инфекции у обезьян, результаты многолетних исследований. // Материалы Сухумской международной научно-практической конференции:90 лет НИИЭПиТ АНА «Актуальные вопросы экспериментальной биологии и медицины» 20-22 сентября 2017, г. Сухум, Абхазия. С. 63-69.
6.Аршба И.М., Орлов С.В., Рубальский Е.О., Алешкин А.В., Рубальский О.В., Агумава А.А., Полякова В.И., Черкашина Е.В. Влияние применения литических бактериофагов на динамику фагочувствительности патогенных и условно-патогенных бактерий на индивидуальном и групповом уровне на модели обезьян.// Материалы четвертой научно-практической конференции с международным участием «Бактериофаги. Теоретические и практические аспекты применения в медицине, ветеринарии и пищевой промышленности». 24-26 сентября 2018, г. Нижний Новгород, С.-10.
7.Калашникова В.А., Султанова О.А., Демерчян А.В. Чувствительность к антибиотикам штаммов Staphylococcus, выделенных от обезьян. // ж/л «Ветеринария», 2018, № 1, с. 17-20
8.Егорова Т.П., Гвоздик Т.Е., Холодилова Л.И., Лечение обезьян при кишечных протозойных инвазиях. // Журнал Ветеринария, 2018, №8, с.46-49.
9.Черкашина Е.В., Аршба И.М., Рубальский О.В., Рубальский Е.О., Полякова В.И. Молекулярно-генетическая детекция стафилококкового бактериофага у интактных обезьян при его пероральном введении. Сб. Международной научно-практической конференции «Молодые ученые в медицине и биологии» 18-19 апреля 2019 год, г. Сочи, с. 204-210.
10.Калашникова В.А. Молекулярное типирование метициллин-чувствительных Staphylococcus aureus (MSSA), изолированных от обезьян, на основе полиморфизма коагулазного гена. // ж/л Ветеринария сегодня, 2019, № 3, с. 57-62.
11.Галимзянов Х.М., Башкина О.А., Досмуханова Э.Г., Абдрахманова Р.О., Демина Ю.З., Даудова А.Д., Алешкин А.В., Несвижский Ю.В., Рыбкин В.С., Афанасьев С.С., Сентюрова Л.Г. , Аршба И.М. и др. Методы исследования биопленок. Астраханский медицинский журнал, Т14, №3, 2019, с. 8-20.
12.Раковская И.В., Аршба И.М., Бархатова О.И., Левина Г.А., Горина Л.Г., Гамова Н.А., Гончарова С.А. Выявление необычных клеток микоплазм, персистирующих у обезьян. Астраханский медицинский журнал, №4, 2019, с. 45-52.
Медико-биологические аспекты биобезопасности
1. Установлено, что нормальная микробиота кишечника разных видов низших азиатских и африканских обезьян представлена различными таксономическими группами микроорганизмов и по качественному и количественному показателям приближается к таковой здорового человека.
2. В рамках изучения естественной инфекции хеликобактериоза установлено, что в слизистой оболочке желудка и 12-перстной кишки обезьян методом ПЦР определяется достаточно высокий процент инфицированности H.pylori. В ДНК H.pylori установлено присутствие генов ure (36,9%), vac A (21,9%), cag A (6,2%), а также различных их сочетаний. Несмотря на высокий процент выявления ДНК H.pylori, в отличие от человека, у обезьян практически не встречаются язвенные поражения желудка и 12 перстной кишки, равно как и опухоли желудка. Процесс ограничивается воспалительными изменениями разной степени выраженности. Вероятно, это объясняется тем, что гены-маркеры патогенности H.pylori у обезьян встречаются в 10 раз реже, чем у человеческих штаммов.
3.Проведены исследования урогенитальных инфекций (УГИ) разных видов обезьян. Установлено методом ПЦР широкое распространение спонтанной инфекции хламидиями и представителями семейства Mollicutes (микоплазмы, уреаплазмы) среди разных видов и возрастных групп, низших африканских и азиатских обезьян. Возбудители УГИ (C.trachomatis, M.hominis, U.urealyticum) обнаруживаются у клинически здоровых обезьян с нормальной детородной функцией и у животных с разнообразной патологией урогенитального тракта. При патологии беременности и родов и воспалительных процессах урогенитального тракта обнаружение возбудителей инфекций резко возрастает. При всех случаях патологии преобладающим патогеном является C.trachomatis (71,4%).
4.Разработаны ПЦР тест-системы для видовой мультиплексной детекции и идентификации Chlamydia trachomatis и Chlamidophila pneumoniae.
5.Установлен видовой состав паразитофауны кишечника обезьян 6 видов и степень зараженности каждого вида различными паразитами. Для обезьян характерна как моно-, так и полиинвазия. Обнаружены многочисленные сочетания кишечных простейших с гельминтами и энтеробактериями.

Аршба Илона Мурмановна

И.о. заведующий лабораторией
Tel.: +7(862)243-20-28
mail@primatologia.ru
/